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NEWS尊龙凯时:一文了解AAV感染肠道的血清型、启动子及注射用量
来源:仇秋世 日期:2025-08-19肠道是整体代谢的重要器官,对维持生命活动至关重要。哺乳动物的肠道可分为小肠和大肠。小肠 включает 十二指肠、空肠和回肠,主要负责营养物质的吸收,其内壁的绒毛和微绒毛显著增加了表面积,促进消化酶对食物的分解与吸收。大肠则由盲肠、结肠和直肠组成,主要负责水分的再吸收及粪便的形成,并且丰富的微生物群体参与了维生素合成和纤维素的发酵过程。肠道的上皮细胞、免疫细胞及内分泌细胞相互协作,确保消化功能的正常运行,并保护机体免受病原体侵袭。
肠道相关疾病种类繁多,涉及从简单的消化不适到复杂的恶性肿瘤等多个方面。其中,炎症性肠病(IBD)和肠易激综合征(IBS)是较为常见的类型。炎症性肠病是一种特发性肠道炎症性疾病,包括克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC),通常与肠道屏障的功能障碍有关。肠易激综合征则是一种功能性肠道病症,由多因子引起,可导致肠-脑互动异常。
近年来,肠道微生物的研究逐渐受到关注,研究表明其多样性与肠道内环境的稳态及宿主健康密切相关,能够影响宿主的代谢、免疫与神经系统。对于肠道研究,肠道屏障功能和肠-脑轴等议题成为了热点。
在基因功能研究中,重组腺相关病毒载体(rAAV)由于其多样的血清型、低免疫原性、长期稳定的基因表达以及广泛的宿主范围,对基因治疗递送至关重要。随着转基因动物研究的局限性显现,越来越多的研究者利用AAV载体高效感染肠道,以探究基因功能。AAV血清型因其衣壳蛋白结构的不同而具有不同的组织亲嗜性,其中AAV9、AAV8和AAVrh10被广泛应用于感染小肠和结肠,特别是AAV9,因其灵活的注射方式而在肠道相关研究中使用最为广泛。
利用多款启动子构建AAV载体,支持广泛表达的如CBh、CMV、CAG等序列,以及肠道特异性的如Villin、MUC2、Lgr5等,能够精准靶向不同类型的肠道细胞,从而实现高效的基因传递。除了常规的腹腔注射与尾静脉注射外,肠系膜上动脉(SMA)注射、灌肠及结肠内注射等方式也被证明可有效递送AAV载体。
克罗恩病(CD)是一种复杂的慢性胃肠道炎症。研究发现糖蛋白Stanniocalcin-1(STC1)在炎症期间的上调显著,且与应激反应密切相关。中山大学附属第一医院的研究团队发现,克罗恩病患者及小鼠模型的发炎结肠粘膜中STC1表达显著增加,进一步的实验证实,STC1在结肠炎和应激诱导的细胞死亡中扮演了重要角色。
SPARC蛋白在肠上皮屏障中的作用尚不明确,但其对细胞间相互作用的影响极为关键。研究指出,升高的SPARC通过与OTUD4相互作用并激活MYD88/NF-κB通路,显著破坏克罗恩病中的肠道屏障的完整性。研究表明,使用含有Villin启动子驱动的AAV9病毒载体,可有效降低结肠上皮细胞中SPARC的表达,从而维持肠上皮细胞的完整性。
溃疡性结肠炎(UC),以肠道病理性黏膜破坏、溃疡形成、结肠缩短等为主要特征,已有研究表明多糖在其治疗中有重要作用。江西中医药大学的研究团队发现葛根多糖(PPL)通过调节PI3K信号通路对UC具有缓解作用,证实PI3K的抑制影响PPL的功效。
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