### 分化流程概述

在此分化流程图中，涉及人多能干细胞（hPSC）、中脑神经祖细胞（mNPC）和中脑多巴胺神经元（mDA）的分化过程。接下来是详细的试剂盒组成和产品信息，旨在帮助研究人员进行相关培养和实验。

#### 试剂盒组成信息

以下是基础培养基和补充剂的组成情况：

注：补充剂的浓度在使用时需注意稀释至最终浓度1×。

#### 辅助试剂与耗材信息

辅助试剂和耗材包括细胞培养板、离心管等，均需按照相应的储存条件进行保存。

### 实验内容与方法

以hESCH1及6孔板为例，以下是各阶段培养基成分和实验步骤：

#### 试剂准备

根据研究阶段，配置相应的培养基。例如：

• 中脑神经祖细胞阶段（mNPC）使用mNPC诱导培养基（0-2），成分包括基础培养基1和补充剂A、B。
• 中脑多巴胺神经元阶段（mDA）使用mDA诱导培养基，成分为基础培养基1和补充剂A。

#### hESC培养和准备

按Advance人多能干细胞培养基使用说明书进行培养准备。

#### DAY0-9：hESC分化为中脑神经祖细胞（mNPC）

在细胞已达到75%-85%汇合度后，进行以下操作：

1. 清洗细胞并加入含Y-27632的Accutase。
2. 离心细胞并重悬于mNPC诱导培养基中。
3. 计数细胞并接种于包被的培养板，培养48小时。

#### DAY9-23：mNPC诱导分化为中脑多巴胺神经元（mDA）

在第9天开始转移培养基，直到第23天。可于D23用无血清细胞冻存液进行细胞冷冻。

#### DAY23-40：mDA成熟阶段

在此阶段，逐日更换培养基，直至细胞成熟，最后检测神经元相关标志物的表达。

### 品牌推荐

在研究过程中，我们推荐使用尊龙凯时提供的相关试剂和工具，这将极大地支持您在细胞培养和分化实验中的需求。其中包括：

• hPSC诱导分化多巴胺神经元试剂盒
• Advance人多能干细胞培养基

请确保在实验中遵循上述步骤和条件以确保实验的顺利进行。如有问题，请随时与我们联系，并关注尊龙凯时的最新产品和信息。