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尊龙凯时MatrixGel体内成瘤实验方案

来源:连欣勤 日期:2025-09-05

MatrixGel 是一种可溶性基底膜,由小鼠肉瘤组织提取而来,含有层粘连蛋白(糖蛋白)、IV型胶原、巢蛋白(糖蛋白)、及基底膜蛋白聚糖(硫酸乙酰肝素蛋白聚糖)等多种细胞外基质蛋白和必需生长因子。此材料已被广泛应用于干细胞培养、血管生成实验及组织工程等领域。

尊龙凯时MatrixGel体内成瘤实验方案

细胞源异种移植(CDX)模型

细胞源异种移植模型是评估抗癌疗法的重要标准。通过在免疫缺陷动物中构建的异种移植模型,其对药物的反应与临床实践高度一致,使其成为肿瘤学研究中的可靠工具。相关研究表明,MatrixGel 在促进裸鼠细胞源异种移植瘤形成中具有显著的有效性。

MatrixGel 使用指南

MatrixGel 应根据实验需求从-20/-80℃ 解冻,并进行分装。所有操作需在冰上进行,并使用预冷的枪头和离心管。在分装过程中,应将其处理成一次性的小份量,以减少冻融次数。需要注意的是,所有接触MatrixGel 的耗材或培养基需预冷至冰上温度,以避免解冻后的MatrixGel 在10℃以上的温度下快速固化。

实验步骤

1. 植入前3天,将大约05×106个细胞接种于10cm的培养皿中。
2. 植入前1天更换培养基(DMEM/F12+10%FBS+1%青链霉素)。细胞活性是异种移植成功的关键,因此需保持培养基的新鲜度。
3. 使用胰酶消化收集细胞,PBS清洗3次后,计数并重悬于PBS(1×107细胞/mL)。细胞悬液的总体积应根据实验所需的小鼠数量进行调整。
4. 根据每只小鼠15mL离心管的比例,将60μL细胞悬液与60μL MatrixGel 混合,细胞与基质体积比为1:1。MatrixGel 在10℃以上会胶化,因此需提前在4℃下过夜解冻,并全程保持在低温环境下。

注射及观察

1. 使用异氟烷吸入麻醉小鼠,整个操作过程中要确保小鼠的体温并监测其呼吸情况。
2. 使用70% 乙醇对注射部位进行3次消毒。
3. 采用21-25G针头将混合液皮下注射至小鼠体内,尽量避免细胞损伤。

后续监测

1. 每日观察小鼠的健康状况。
2. 每周3次使用游标卡尺测量肿瘤的尺寸,并记录小鼠的体重,直到肿瘤体积达到1,000-1,500 mm³(注:实验终点需根据研究目标进行调整)。记录肿瘤的长径(最长直径)、短径(与长径垂直的直径)及高度。
3. 根据实验需求,在适当时机给予药物处理。

肿瘤收集及处理

1. 采用CO₂窒息法处死小鼠,呼吸停止后持续通入CO₂至少1分钟,然后实施颈椎脱位。
2. 使用70% 乙醇清洁肿瘤区域。
3. 切开皮肤并小心剥离肿瘤,置于无菌管中并于冰上保存。
4. 收获的肿瘤可进一步用于染色与表征分析。

在生物医疗领域,尊龙凯时提供了高质量的MatrixGel,为癌症研究及干细胞技术的发展提供了支持。通过不断优化实验条件,我们力求在肿瘤学研究中实现最佳效果。

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