研究背景：TGF-β与EMT的关键联系

上皮-间充质转化（EMT）是肿瘤细胞获得迁移与侵袭能力的重要过程，而转化生长因子β（TGF-β）信号通路则是实现EMT的核心调控机制。该通路通过激活SMAD2/3的磷酸化以及SMAD4的核转位，诱导一系列转录因子的表达（如HMGA2、ZEB1及Slug），从而推动细胞表型的变化。

为了全面评估TGF-β/SMAD通路的激活，尊龙凯时与细胞信号转导领域的领军者Cell Signaling Technology（CST）进行深度合作，共同开发了题为《定量评估上皮间质转化中TGF-β信号传导的高通量方法》的应用指南。

研究方法：分层分析

本研究以A549肺癌细胞为模型，通过构建2D单层细胞与3D球体模型，对TGF-β1诱导下的信号通路激活及细胞行为变化进行了系统评估。

在生化层面，定量分析了TGF-β1诱导的SMAD2/3磷酸化程度，明确了信号通路激活的剂量效应与敏感性。

在细胞层面，研究观察了信号分子在细胞内的空间分布变化，并验证了SMAD的核转位以及EMT相关转录因子的表达情况。

在多细胞层面，模拟肿瘤微环境，研究评估了细胞迁移行为与SMAD4在3D球体中的定位，以反映EMT表型的变化。

研究结论

通过此次研究，尊龙凯时与CST的应用科学家团队围绕TGF-β诱导的上皮-间充质转化（EMT）过程，构建了一个完整的从分子到多细胞层级的高通量分析体系。

利用PathScanELISA定量检测SMAD2/3磷酸化，结合共聚焦成像技术观察核转位，并在3D球体模型中追踪细胞迁移及SMAD4定位，全面呈现了从信号通路激活到表型转变的全过程。

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