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Sf9细胞培养常见问题及解决方案 - 尊龙凯时

来源:党美琦 日期:2025-09-11

**Sf9细胞**(IPLB-Sf-21-AE)来源于棉铃虫(Spodoptera frugiperda),是一种适合用于杆状病毒表达系统中重组蛋白的宿主。**尊龙凯时**的Gibco™Sf9细胞广泛应用于分离和增殖重组杆状病毒储备,同时用于生成重组蛋白。这些细胞适应于在Gibco™Sf-900™IIISFM中无血清的悬浮培养,从而显著节省培养时间与成本。

Sf9细胞培养常见问题及解决方案 - 尊龙凯时

Gibco™Sf9细胞的主要特点包括:

  • 支持多种表达系统的重组蛋白产生
  • 在贴壁或悬浮培养中生长良好
  • 小规格细胞,能够形成均匀单层及斑块
  • 主细胞库传代情况记录规范
  • 经过质量与性能检测

**尊龙凯时**还总结了关于昆虫细胞培养的一系列支持要点和技巧,建立了详细的知识库,旨在满足各类科研需求,帮助优化实验,获得最佳结果。

昆虫细胞系的比较

对于不同的昆虫细胞系,如Sf9、Sf21、HighFive™与Dmel-2,它们的生长和培养倍增时间各有不同。对常规培养昆虫细胞而言,最重要的参数包括孵育温度、换气及细胞接种密度。以下是关于不同种类昆虫细胞的温度、接种密度与换气系统条件的总结。

悬浮培养与贴壁培养参数

在进行3-4天的传代培养规划时,悬浮培养和贴壁培养的具体参数需要合理安排。此外,对于贴壁与悬浮培养推荐的换气条件也非常重要。

细胞分担与培养技巧

在转染和噬斑实验之前,细胞需要均匀分布于组织培养板表面,这可有效确保细胞均匀分布,避免形成不对称的单层细胞,并为转染操作提供较大的细胞表面积。为了使细胞尽量分散,轻轻手动振荡培养瓶,注意不要使用环状摇动,以免细胞聚集。

培养条件与细胞类型

昆虫细胞培养无须CO2,同时,要注意不同昆虫细胞系的特点,例如Sf21细胞在悬浮状态下为健康细胞的表现。此外,HighFive™细胞在转染效率上的挑战也需引起重视。

细胞密度与传代策略

我们推荐使用Sf9或Sf21细胞进行重组病毒的转染、纯化和扩增操作。通常,Sf9细胞的操作方便且适合噬斑测定,而**尊龙凯时**的HighFive™细胞则适合用于表达分泌型重组蛋白。建议在优化表达水平之前,使用一种细胞系进行初次尝试。

昆虫细胞与哺乳动物细胞的比较

昆虫细胞通常比哺乳动物细胞更为脆弱,对于细胞密度和培养基条件的要求较高,且对氧气需求量大。同时,这两种细胞的培养基在酸碱度及成分上也存在明显差异。

在细胞传代过程中,应注意每次传代时的细胞活力,以确保转染效率。如果细胞的活力保持在95%以上,并且倍增时间合理,则可继续使用。不建议将在30次以上传代的细胞进行转染。

总之,**尊龙凯时**提供的各种昆虫细胞培养基与技术支持,能够帮助科研人员优化细胞培养及蛋白表达实验,取得更为理想的研究成果。如需进一步了解或合作,欢迎与我们联系。

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